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BCA蛋白浓度测定试剂

发布时间:2013-07-29 10:31  点击:

产品编号

包装

价格

7010004-B

30ml/150T

108.00

7010004-B1

70ml/350T

240.00

产品简介

蛋白质定量是蛋白质研究的基础工作之一。BCA(Bicinchoninic Acid)是理想的蛋白质定量方法,是当前比Lowry法更优越的专用于检测总蛋白质含量的产品。该方法以快速灵敏、稳定可靠,对不同种类蛋白质检测的变异系数非常小而倍受专业人士的青睐。BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。在组织细胞裂解实验中,常用浓度的去垢剂SDSTriton X-100Tween不影响检测结果,但受螯合剂(EDTAEGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。实验中,若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高,可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒,该产品不受此影响。因此,BCA试剂与之配合使用,可免除您实验中的许多烦恼。

基本原理:

碱性条件下,蛋白将Cu2+还原为Cu+ Cu+BCA试剂形成紫颜色的络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。

主要特点:

1. 准确灵敏,线性范围广。BCA试剂的蛋白质测定范围是102000ug/ml

2. 快速:45分钟内完成测定,比经典的Lowry法快4倍而且更加方便。

3. 经济实用:在微孔板中进行测定,可大大节约样品和试剂用量。

4. 不受样品中离子型和非离子型去污剂影响。

5. 检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马氏亮蓝。

包装

产品编号

7010004-B

7010004-B1

BCA试剂A

30ml

 70ml

BCA试剂B

0.6ml

1.4ml

说明书

1 

保存

BCA试剂 A, B 室温保存,本试剂盒自订购之日起一年内有效。

使用说明

1.配制工作液根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂A1体积BCA试剂B50:1)配制适量BCA工作液,充分混匀。BCA工作液室温24小时内稳定。

2.稀释标准品:取蛋白标准品用PBS稀释,使终浓度为0.5mg/ml。将标准品按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20微升加到96孔板的蛋白标准品孔中,加PBS补足到20微升。

3.加适当体积样品到96孔板的样品孔中,补加PBS20微升。

4.各孔加入200微升BCA工作液,37放置30分钟。

5.冷却到室温,用酶标仪测定A562,根据标准曲线计算出蛋白浓度。

注意事项

1.在低温条件或长期保存出现沉淀时,可搅拌或37温育使溶解,如发现细菌污染则应丢弃。 

2.样品中若含有EDTAEGTADTT、硫酸铵、脂类会影响检测结果,请试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒,高浓度的去垢剂也影响实验结果,可用TCA沉淀去除干扰物质。 

3.要得到更为精确的蛋白浓度结果,每个蛋白梯度和样品均需做复孔,每次均应做标准曲线。 

4.当试剂AB混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失,工作液在密闭情况下可保存1周。 

5.需准备37水浴或温箱、酶标仪或普通分光光度计,测定波长为540-595nm之间,562nm最佳。酶标仪需与96孔酶标板配套使用。使用分光光度计测定蛋白浓度时,试剂盒测定的样品数量会因此而减少。使用温箱孵育时,应注意防止因水粉蒸发影响检测结果。